Validation du Produit

En tant qu'entreprise de scientifiques, nous comprenons à quel point il est important de travailler avec des produits dont la spécificité, la sélectivité, l'activité, la stabilité et les performances ont été validées.

Nous travaillons dur pour nous assurer que chaque produit est validé dans plusieurs applications de recherche et avec des échantillons dérivés de plusieurs espèces, et nous partageons ces données sur notre site Web. Notre processus de validation utilise une variété de techniques, notamment : western blot, immunocytochimie, ELISA, cytométrie en flux, immunofluorescence, puces à protéines, immunoprécipitation et immunoprécipitation de la chromatine.

La réactivité d'un anticorps avec des homologues de différentes espèces peut être une caractéristique souhaitée, rendant le produit plus polyvalent, ou un effet secondaire indésirable. Nous partageons toutes nos données de spécificité sur notre site Web, ce qui vous permet de prendre des décisions d'achat éclairées.

Figure 1: Anti-AIF1 Anticorps (A82670) (1µg/ml) coloration de lysats de cortex frontal humain (A), de cerveau de rat (B), de cerveau de souris (C) et de cerveau de porc (D) (35 µg de protéine dans un tampon RIPA). Détecté par chimiluminescence.

Figure 2: Analyse par Western Blot de lysats de tissus cérébraux entiers à l'aide de l'anti-MAP2 anticorps (A85363) (1:50 000, vert) : [1] standard de protéine (rouge), [2] cerveau de rat adulte, [3] cerveau de rat E20 embryonnaire, [4] cerveau de souris adulte.

Un nombre croissant de nos anticorps sont maintenant testés pour la spécificité et la sélectivité contre plus de 19 000 protéines humaines de pleine longueur sur des puces à protéines à l'échelle du génome humain. Ces puces comparent la liaison d'un anticorps à une protéine cible et la liaison à des protéines hors cible, offrant un aperçu complet de la spécificité et de la sélectivité d'un anticorps. Avec nos anticorps validés par puce à protéines, les chercheurs peuvent être sûrs d'utiliser des outils de précision.

Figure 3: Analyse d'une puce à protéines contenant plus de 19 000 protéines humaines de pleine longueur à l'aide de l'anti-spectrine bêta III [SPTBN2/1584] anticorps (A253226). Z-Score et S-Score : Le Z-score représente la force d'un signal qu'un anticorps monoclonal (MAb) (en combinaison avec un anticorps secondaire anti-IgG marqué par fluorescence) produit lors de la liaison à une protéine particulière sur la puce HuProt™. Les scores Z sont décrits en unités d'écarts types (SD) au-dessus de la valeur moyenne de tous les signaux générés sur cette matrice. Si les résultats pour les cibles sur la matrice HuProt™ sont classés par ordre décroissant du Z-score, le S-score est la différence (également en unités de SD) entre les Z-scores. Le S-score représente donc la spécificité de cible relative d'un MAb par rapport à sa cible prévue ; un MAb est considéré comme spécifique à sa cible visée si le MAb a un S-score d'au moins 2,5. Par exemple, si un MAb se lie à la protéine X avec un Z-score de 43 et à la protéine Y avec un Z-score de 14, alors le S-score pour la liaison de ce MAb à la protéine X est égal à 29.

Nous avons intégré la validation par knock-out, à l'aide de CRISPR/Cas9, dans le cadre de notre processus standard de validation des anticorps. Le sceau validé par knock-out indique qu'un anticorps a vu sa spécificité confirmée par la validation par knock-out.

Figure 4: Analyse par Western Blot d'extraits de cellules 293T normales (Control) et de cellules 293T knock-out ELAVL1 (KO), en utilisant l'Anti-ELAVL1 Anticorps (A13545) à une dilution de 1:1000. Anticorps secondaire : IgG de chèvre anti-lapin (H+L) (HRP) (AS014) à une dilution de 1:10 000.

Figure 5: Analyse par Western Blot d'extraits de cellules HeLa normales (Control) et de cellules HeLa knock-out S100A4 (KO), en utilisant l'Anti-S100A4 Anticorps (A13562) à une dilution de 1:1,000. Anticorps secondaire : IgG de chèvre anti-lapin (H+L) (HRP) (AS014) à une dilution de 1:10 000.

Nous encourageons tous nos clients à soumettre des critiques de produits et à partager ce qui fonctionne et ce qui ne fonctionne pas. Toutes les critiques sont publiées en ligne, permettant aux scientifiques de se renseigner sur les performances des produits, les nouvelles applications, les dilutions optimales et de voir des images de nos produits au travail.

Figure 6: Analyse par immunofluorescence d'astrocytes en culture primaire à l'aide de l'Anti-GFAP Anticorps (A85419) (vert) et coloration de l'ADN nucléaire DAPI (bleu). Données soumises dans une évaluation de produit client.

Figure 7: Analyse par Western Blot d'extraits de tissus cérébraux de rat sondés avec l'Anti-mTOR Anticorps (A27028) (piste A), l'Anti-FoxO3A Anticorps (A26998) (piste B), l'Anti-AKT Anticorps (phospho S473) (A27292) (piste C), et Anti-NLRP3 Anticorps (A14882) (Piste D). Données soumises dans une évaluation de produit client.